(三)根据物质的吸附性差别进行分离

　　1.物理吸附基本规律 — 相似者易于及附

　　硅胶、氧化铝是极性吸附剂，遵循“相似者易于吸附”的经验规律。活性炭为是非极性吸附剂，与硅胶、氧化铝相反。

　　为避免发生化学吸附，酸性物质宜用硅胶，碱性物质则宜用氧化铝进行分离。

　　2.极性及其强弱判断

　　化合物的极性由分子中所官能团决定

　　3.吸附色谱法应用

　　4.聚酰胺

　　聚酰胺吸附属于氢键吸附，酰胺羰基与酚类、黄酮类化合物的酚羟基，或酰胺键上的游离氨基与醌类、脂肪羧酸上的羰基形成氢键缔合而产生吸附。吸附强弱则取决于各种化合物与之形成氢键缔合的能力。

　　聚酰胺特别适合分离酚类、醌类、黄酮类化合物。

　　(1)形成氢键的基团数目越多，吸附能力越强。

　　(2)成键位置对吸附力也有影响。易形成分于内氢键者，其在聚酰胺上的吸附相对减弱。

　　(3)分子中芳香化程度高者，则吸附性增强;反之则减弱。

　　一般情况下，各种溶剂在聚酸胺术上的洗脱能力由弱至强，可大致排列成下列顺序：

　　水→甲醇→氢氧化钠水溶液→甲酰胺→二甲基甲酰胺→尿素水溶液

　　5.大孔吸附树脂

　　(1)吸附原理

　　大孔吸附树脂是吸附性和分子筛性原理相结合的分子材料。吸附性是由于范德华引力或产生氢键的结果，分子筛性是由于其本身多孔性结构所决定的。

　　(2)影响吸附的因素

　　大孔吸附树脂本身的性质、溶剂的性质和化合物的性质是影响吸附的3个重要因素。

　　(3)大孔吸附树脂的应用

　　(4)洗脱液的选择

　　洗脱液可使用甲醇、乙醇、丙醇、乙酸乙酯等。

　　(四)根据物质分子大小差别进行分离

　　物质分子大小不同的化合物可用透析法、凝胶过滤法、超滤法、超速离心法等分离。

　　1.凝胶过滤法

　　凝胶过滤法也叫凝胶渗透色谱、分子筛过滤、排阻色谱，系利用分子筛分离物质的一种方法。

　　常用的有葡聚糖凝胶(Sepadex-G)以及羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex-LH-20)。Sephadex G只适于在水中应用。Sephadex LH-20既可在水中应用，又可在由极性与非极性溶剂组成的混合溶剂中应用。

　　2.膜过滤法

　　膜过滤法主要包括渗透、反渗透、超滤、电渗析、透析、液膜技术等。透析法多用于水溶性的大分子和小分子物质的分离，如蛋白质、酶、多糖分离过程中的脱盐。按照孔径大小，可将透析膜分为：微滤膜、超滤膜、反渗透膜、纳米膜。

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